1、在选定添加线的时候,注意要先右键 设为活动。然后在不处理,不然就是默认值,我当时摸索了半天。大家自己试试就会明白了。
2、如果药物有抑制细胞活性的作用,习惯上称之为IC50(称呼而已)。【实例操作1】细胞毒实验计算IC50 · 细胞毒实验:SRB法,MTT法 · 阴性对照组Concrol:给药浓度为0的含细胞的孔,实验中以该组细胞活力当成100%。· 空白组Blank:无细胞的孔,用于吸光度的调零(扣掉96孔板自身的一点儿吸光度)。
3、药物组织分布用Drug And Statistics软件算。药物组织分布是指药物吸收后随血液循环到各组织间液和细胞内液的过程。
4、兼容性方面“苏堤”GPU支持英特尔、AMD、飞腾、龙芯、兆芯、海光等CPU,并兼容Windows、Linux、麒麟、统信等主流操作系统。
5、已经画好了这个柱状图,但是感觉图例颜色不好看,想更换其颜色。然后双击该柱子,edit mode中选择independent。然后进入新的界面,在color中可以看到偶很多种颜色分类,可以选择自己喜欢了,这里选择blue。选择完成之后,然后点击选择ok即可。
1、实验结果的统计处理需根据具体实验要求来确定。你可以选择使用吸光度(OD)值、细胞存活率或细胞抑制率等作为统计指标。 在查阅相关文献时,你会注意到这些指标在文献中均有应用。你可以参考这些文献来选择最适合你实验的数据表达方式。
2、⒍理论未必都是对的。要根据自己的实际情况调整。⒎实验时应设置调零孔,对照孔,加药孔。调零孔加培养基、MTT、二甲基亚砜。对照孔和加药孔都要加细胞、培养液、MTT、二甲基亚砜,不同的是对照孔加溶解药物的介质,而加药组加入不同浓度的药物。⒏避免血清干扰。
3、要计算细胞抑制率,用1减去所得到的增殖率即可。
CCK8,即Cell Counting Kit-8,与MTT法的主要区别如下:原理不同 Cell Counting Kit-8:CCK-8 试剂盒利用了日本同仁化学研究所(Dojindo)开发的四唑盐WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)。
CCK-8法能快速检测;3)CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度;4)CCK-8法的重复性优于MTT 法;5)CCK-8法对细胞毒性小;6)CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。当然,与MTT相比,CCK8有以下2点不足:1)与MTT法相 比,CCK8和XTT的价格比较贵。
CCK-8法能快速检测。CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度。 CCK-8法的重复性优于MTT 法,产生的formazan 是水溶性的,减少因洗涤和溶解带来的误差。CCK-8法对细胞毒性小,可以多次测定选取最佳测定时间,与MTT 方法相比线性范围更宽,灵敏度更高。
cck8实验原理细胞活力检测试剂盒(CCK-8)可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。
1、在用酶标仪检测结果的时候,为了保证实验结果的线性,MTT吸光度最好在0-0.7范围内,MTT一般最好现用现配,过滤后4℃避光保存两周内有效,或配制成5mg/ml保存在-20℃长期保存,避免反复冻融,最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。
2、测一周不换液细胞还能活吗?——MTT加进去之后只要4小时孵育时间就可加DMSO,之前的时间是刺激时间,应按实验要求自己掌握换液频率。
3、MTT检测法主要用于评估细胞的相对数量和活力,而非绝对计数。在进行酶标仪检测时,为了确保实验结果的线性关系,建议MTT吸光度保持在0-0.7的范围内。MTT的使用应遵循新鲜制备原则,即现用现配,过滤后可在4℃避光条件下保存两周,或者配制成5mg/ml浓度于-20℃长期保存。
4、置摇床上低速振荡10min,使结晶物充分溶解。镜下观察蓝紫色结晶已溶解就可以测了。不能太晚测,MTT会变质。
5、每板设对照(加100(储存液100 1640)。2)置37℃,5%CO2孵育16-48小时,倒置显微镜下观察。3)每孔加入10 ul MTT溶液(5 mg/ml,即0.5%MTT),继续培养4 h。
6、测定波长570nm。根据OD值的大小计算反应体系中细胞增殖程度。目前MTT法常用于以下几个方面的研究:检测细胞活性:常作为细胞毒性试验的一种方法。体外药物敏感实验:该方法简便、经济、快速,重复性好,所需的细胞数较少,目前广泛的用于临床前的抗癌药物的筛选研究。一些细胞因子活性的研究。